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松塔胶囊中多糖含量测定论文

发布时间:2020-06-30 10:55:22 文章来源:SCI论文网 我要评论














SCI论文(www.lljyb.com):

摘要:利用碱提醇沉法提取松塔的多糖,以松塔多糖为原料制备松塔胶囊。采用苯酚-硫酸法测定松塔胶囊中的多糖含量,该方法测定多糖法具有良好的稳定性、线性(r=0.9997)、日内度(各浓度下RSD值均小于0.26%)及加样回收(R=99.8%)。多糖测定方法操作简便,结果准确,可用于松塔胶囊的质量控制。

关键词:松塔胶囊;多糖;苯酚-硫酸法;含量测定

本文引用格式:聂兴羽,李永杰,林家莉,等.松塔胶囊中多糖含量测定[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(66):323-324.

Determination of Polysaccharides in Songta Capsules

NIE Xing-yu,LI Yong-jie,LIN Jia-li,LIU Guang-ming,LI Jing-wei*

(Dali University College of Pharmacy and Chemistry,Dali Yunnan)

ABSTRACT:The polysaccharides in Pinecone was isolated by alkali extraction and alcohol precipitation methods,the formulations of corresponding capsule were then developed for the extracted polysaccharides.The polysaccharides content in Pinecone Capsules was assayed by C6H5O-H2SO4 method.The method was found to have a good linearity(r=0.9997),intra-day precision and appropriate recovery test(R=99.8%).The method established in this study is simple,accurate and can be used for quality control of the Pincone Capsules.

KEY WORDS:Pinecone Capsule;Polysaccharides;C6H5O-H2SO4 method;Content determination

0引言

松科松属植物云南松(Pinus yunnanensis)的球果(即松塔)可入药,祛痰、止咳、平喘、祛风、润肠、安神、抗病毒,中医惯用其治疗慢性气管炎、哮喘、咳嗽等。松塔胶囊是以云南松的松塔经加工提取制得,具有提高免疫力、抗癌、抗氧化、调血脂等功效。近年来。国内外学者发开户即送58体验金不限id松塔提取物具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、增强免疫力等活性[1-6]。本课题组前期曾初步证明云南松松塔中抗病毒的有效成分为木质素-多糖复合物[7]。在前期分离、提取、精制的基础上制备了松塔胶囊,本研究将进一步对前期制备的松塔胶囊中多糖含量进行测定。

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1材料

1.1材料与试剂


松塔多糖胶囊(自制);微晶纤维素(山东光大科技发展有限公司);滑石粉(广西龙胜华美滑石开发有限公司);苯酚、硫酸、D-葡萄糖、盐酸、氢氧化钠、冰醋酸均为分析纯;实验用水均为纯水。

1.2仪器与设备

D5KR低速大容量冷冻离心机(长沙东旺实验仪器有限公司);AL204电子天平(梅特勒-托利多(上海)有限公司);TU-1901紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);DHG-9075A电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司);HH-s2s数显恒温水浴锅(江苏金坛市大地自动化仪器厂)。

2方法与结果

2.1松塔胶囊的制备


精密称取松塔粉末4kg,加入95%乙醇溶液5L,浸泡24h,除去乙醇,重复浸泡两次。用1.0mol/L的NaOH溶液4.5L浸泡残渣24h后,移出残渣,滤纸精滤收集的NaOH溶液。滤液用冰醋酸调节pH至5.0,静置4h。离心,取沉淀物于表面皿中,于45℃烘箱烘干。上清液用5倍95%乙醇溶液稀释,静置24h。将溶液进行离心,取沉淀物取出,置于玻璃表面皿中,于45℃条件下烘箱烘干,高燥物即为松塔多糖。

精密称取2.0g上述松塔多糖粉末,以微晶纤维素和滑石粉作为填充剂,以50%的乙醇溶液作为润湿剂,用湿法制粒方法制备颗粒,干燥整粒后过筛、装壳,即得松塔多糖胶囊。

2.2溶液的配置

2.2.1对照品溶液的配制


精密称取8mg干燥至恒重的葡萄糖对照品,加纯水溶解,定容至1 00mL,得葡萄糖对照溶液。

2.2.2供试品溶液的配制

取胶囊若干,取颗粒内容物,研磨粉碎。精密称取适量加水溶解,定容至100 mL,摇匀,置离心管中,4000 r/min离心10 min,汲取上清,作为松塔多糖胶囊供试品溶液。

2.3样品测定方法

精密量取一定体积样品溶液置于试管中,分别定容至2 mL。空白对照组精密量取2.0 mL的水。各加入6%苯酚溶液1.0 mL,混匀,迅速加入硫酸5.0mL,混匀,置于冰水浴10 min,再于沸水浴加热10min,冷却至室温,待测定吸光度值[8]。

2.4检测波长的确定

分别精密量取对照品溶液0.1、0.5、0.8 mL置于试管中,定容至2 mL。按“样品测定方法”项下方法进行处理。在200~700 nm波长范围内测定吸收度。结果在490 nm处有最大吸收。同法测定松塔胶囊供试液在490 nm处也有最大吸收。

2.5标准曲线的绘制

精密量取对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8、1.0 mL,分别置具塞试管中,定容至2.0 mL。按“样品测定方法”项下方法进行处理。在490 nm处测定吸光度,以葡萄糖对照品浓度(C)为横坐标,吸光度为纵坐标(A),绘制标准曲线并计算回归方程和相关系数。得线性回归方程A=14.805c-0.0084,r=0.9997,线性范围为0.0656-0.8799 mg/mL。

2.6精密度实验

精密量取高、中、低浓度对照品溶液和供试品溶液各1.0 mL,按“样品测定方法”项下方法进行处理,每个浓度平行测定3次。以水同法操作为空白对照,在490 nm处重复测定吸光度三次,记录其吸光度值,RSD值均≤0.26%,表明仪器度良好,符合要求。

2.7稳定性实验

精密量取供试品溶液1.0 mL于带塞玻璃试管中,按“样品测定方法”项下方法进行处理。以水同法操作为空白对照,分别于0、5、10、20、40、60、90、150 min,在490 nm处测定吸光度值,RSD=1.014%。结果表明样品溶液在2h内吸收稳定。

2.8加样回收率

精密称取已知含量的同一批样品,用水溶解并定容制备供试品溶液。采用低、中、高三种浓度,分别加入葡萄糖对照品溶液,各平行加入3次,按拟订方法进行测定,计算加样回收率。平均加样回收率为99.8%,结果见表1。



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2.9样品含量测定

按2.2.2项方法制备样品溶液,按2.3项下操作,以相应试剂为空白,在490 nm下进行测定,由回归方程计算样品中多糖的百分含量。结果批号为2018211、2018212、2018213的3批样品中多糖平均含量分别为每粒13.9、14.1、13.8mg。

3结论

本文测定松塔胶囊多糖含量采用的是苯酚-硫酸发法,该方法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物,是一个比较经典的多糖含量测定方法。该方法简便易行,操作方便,测定结果准确。在滴加硫酸时,由于放热反应剧烈,置冷水中比空气中冷却效果好,测得的结果稳定重开户即送58体验金不限id性好。

参考文献

[1]Tanuma,Yasukazu.Lignin-carbohydrate complexes(LCC)with antitumor activity1[P].JP.,1990-113049.
[2]W.E.I.W.An,Y.Kanazawa,M.Ozawa,K.Nakaya,T.Saito,A.Tanaka,W.G.
U.Y.Bradley.Dendritic cell differentiation and tumor cell apoptosis induced by components of a poly-phenylpropanoid polysaccharide complex[J].Anticancer research,2010,30(2):613-622.
[3]史志婷,刘熙,张海珠.云南松松塔抗HIV-1活性提取物急性毒性实验研究[J].大理学院学报,2014,13(8):4-6.
[4]于冬梅,李冬梅,刘熙,等.云南松松塔提取物对人肝癌细胞增殖的影响[J].时珍国医国药,2014,25(12):2835-2837.
[5]郭美仙,刘光明,沈磊,等.云南松松塔不同极性部位对不同状态豚鼠离体气管的影响[J].大理学院学报,2015,14(8):1-4.
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[7]周萍,林樊,刘洁,等.云南松松塔木质素-糖复合物中的糖含量测定[J].时珍国医国药,2011,22(8):1820-1821.
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